- 齐希梁;李明;刘聪利;宋露露;
【目的】建立欧洲甜樱桃果实VIGS体系。【方法】利用In-Fusion cloning技术,构建欧洲甜樱桃的烟草脆裂病毒(TRV)介导基因沉默表达载体pTRV2-ANS,转入农杆菌GV3101中,采用注射压迫法侵染欧洲甜樱桃果实,通过分子检测、qRT-PCR和表型观察技术评价TRV介导VIGS沉默体系的效果。【结果】TRV::ANS侵染的欧洲甜樱桃果实ans基因的表达显著低于TRV::00侵染的果实。与TRV::00比较,TRV::ANS侵染的欧洲甜樱桃果实的果皮和果肉颜色都没有发生着色,果皮和果肉颜色呈绿色,而TRV::00侵染的欧洲甜樱桃果实的果皮和果肉正常着色。【结论】研究建立的TRV介导欧洲甜樱桃VIGS体系可有效沉默欧洲甜樱桃果实内源基因表达。该体系为欧洲甜樱桃果实品质基因的功能验证及分子机制研究奠定了技术基础。
2018年11期 v.35 1309-1315页 [查看摘要][在线阅读][下载 2564K] [下载次数:953 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:0 ] - 付燕;杨芩;彭舒;蒋瑶;刘伦沛;
【目的】鉴定枇杷属普通枇杷野生种、栎叶枇杷和大渡河枇杷3个种的S-RNase基因型,为利用其优良性状开展种质创新,以及大渡河枇杷分类地位的探讨提供科学依据。【方法】以苹果S-RNase基因高度保守区设计兼并引物对3个种的基因组DNA进行PCR扩增,片段回收、克隆及测序,分别采用BLASTn、BLASTx、DNAMAN和CLUSTALW软件进行同源性检索、序列比对和结构分析。【结果】从参试的3个种中共分离了4个S等位基因,分别为S2-RNase、S26-RNase、S32-RNase和S34-RNase,其中S26-RNase、S32-RNase和S34-RNase为新分离的枇杷S-RNase基因,GenBank登录号分别为:MG765271、MG846012和MG812504。所克隆获得的4个枇杷S-RNase基因与苹果S-RNase基因的氨基酸序列结构相同,具有5个保守区(C1、C2、C3、RC4和C5)和1个高变区(HV)。此外,所获得的4个枇杷S-RNase基因电泳图谱及同源性和进化分析结果表明,大渡河枇杷可能为普通枇杷和栎叶枇杷的杂交后代。【结论】确定了普通枇杷野生种、栎叶枇杷和大渡河枇杷的S-RNase基因型分别为S2S26、S32S34和S26S32。大渡河枇杷S-RNase基因型及S-RNase的同源性和系统进化分析结果支持其可能为普通枇杷和栎叶枇杷杂交后代的结论。
2018年11期 v.35 1316-1323页 [查看摘要][在线阅读][下载 1278K] [下载次数:229 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:1 ] - 苏立遥;张帅;陈旭;徐小萍;赖钟雄;林玉玲;
【目的】研究龙眼miR171家族的分子特性及miR171b调控靶标对GA3、2,4-D的响应和在龙眼体胚发生早期的表达模式。【方法】通过龙眼基因组和转录组数据库筛选得到龙眼miR171成熟体与前体序列,基于邻近法(neighborjoining,NJ)利用MEGA 7.0以及iTOL进行系统发育树的构建以及序列多重比较分析;psRNAtarget预测龙眼miR171家族靶基因,利用改良的RLM-RACE验证靶基因裂解位点;利用qPCR分析不同浓度2,4-D、GA3处理的龙眼胚性愈伤组织(EC)及龙眼体胚发生早期miR171b与其靶基因SCL6(Scarecrow-like)的表达模式。【结果】分子特性分析提示,龙眼miR171各成员之间的进化关系较远,进化来源复杂,进化速率具有差异性;靶基因预测显示miR171家族靶基因主要包括SCL6、SCL15、SCL27、转录剪切体X2和RNA依赖的RNA聚合酶1等;裂解位点验证表明miR171b可以靶向切割SCL6,同时SCL27具有结合位点之外的切割位点。在不同浓度2,4-D和GA3处理下,miR171b与SCL6的表达趋势基本呈现为负调控模式;随着2,4-D浓度的升高,miR171b的转录水平总体呈下调趋势,SCL6的表达量总体呈上调趋势;GA3的存在显著下调miR171b的转录水平,而SCL6的表达量分别在2.5和12.5 mg·L~(-1)GA3时达到最高值和最低值。龙眼早期体胚发生前期(0~6 d),miR171b与SCL6表达模式相似,龙眼早期体胚发生后期(6~12 d),miR171b显著下调,SCL6显著上调,提示大量积累的SCL6对龙眼球形胚(GE)形态建成具有重要作用,而miR171b通过减少转录产物的积累促进SCL6表达。【结论】miR171具有物种间的保守性以及成员间的差异性,同时miR171b及其靶标SCL6通过响应激素调节龙眼早期体胚发生的形态建成。
2018年11期 v.35 1324-1334页 [查看摘要][在线阅读][下载 4116K] [下载次数:378 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:0 ] - 张政达;王景荣;陈丽辉;樊佳茹;韩晓云;王革伏;张志忠;
【目的】克隆根系分泌物介导的甜瓜自毒胁迫响应基因Fe-SOD,分析基因序列特征和表达情况,探讨其功能。【方法】以甜瓜幼苗为材料,通过RT-PCR技术克隆Fe-SOD基因,命名为CmFe-SOD,进行生物信息学分析和亚细胞定位;通过qRT-PCR技术分析CmFe-SOD在自毒胁迫后甜瓜幼苗叶片和根系中的表达模式。【结果】CmFe-SOD基因组DNA全长1 255 bp,开放阅读框918 bp,编码305个氨基酸。生物信息学分析显示CmFe-SOD为酸性亲水蛋白,无信号肽和跨膜区域,二级结构中无规则卷曲比例最高,与三级结构预测结果一致,基因序列包含典型的Fe-SOD蛋白结构域。同源性分析表明,不同来源Fe-SOD在氨基酸序列上具有较高同源性,CmFe-SOD蛋白与黄瓜的关系较近。通过洋葱内表皮GFP荧光定位观察发现,CmFe-SOD定位于细胞质;qRT-PCR结果显示,根系分泌物处理后甜瓜幼苗叶片中CmFe-SOD基因表达水平整体呈增加趋势,在24 h时表达量最高;在根系中呈现先增加后下降趋势,6 h时表达量最高。【结论】CmFe-SOD基因在进化上较保守,参与了甜瓜根系分泌物介导的自毒胁迫响应,自毒胁迫后在叶片中表达量呈持续上升的趋势,在根部呈现先上升后下降的趋势。
2018年11期 v.35 1335-1343页 [查看摘要][在线阅读][下载 1667K] [下载次数:310 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ]
- 王延秀;朱燕芳;陈佰鸿;贾旭梅;郭爱霞;赵通;程丽;胡亚;
【目的】探讨干旱胁迫下楸子对外源一氧化氮(nitric oxide,NO)处理的生理响应特性与作用机制,综合评价后筛选缓解干旱胁迫的最佳NO处理浓度。【方法】以10叶龄的楸子[Malus prunifolia (Willd.) Borkh.]实生苗为试材,采用盆栽控水的方法,在中度水分胁迫(即含水量为土壤最大持水量45%~55%)下,喷施不同浓度外源NO(180μmol·L~(-1)、190μmol·L~(-1)、200μmol·L~(-1)、210μmol·L~(-1)),测定净光合速率(Pn)等光合参数、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性及以脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量、相对电导率(REC)等指标。【结果】相比于对照,外源NO处理缓解了水分胁迫下楸子叶片中MDA含量、Pro、REC、胞间二氧化碳浓度(Ci)以及过氧化物酶(POD)活性的上升幅度,同时也减缓了Pn、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、超氧化物歧化酶(SOD)与CAT酶活性的下降幅度,且具有明显的浓度效应。【结论】主成分分析(PCA)结果显示,特征根大于1的2个主成分的方差贡献率达92.932%,190μmol·L~(-1)硝普钠(SNP)处理得分最高,效果最佳。适宜浓度SNP处理能够激活水分胁迫下楸子幼苗的抗氧化酶系统,并可以保护细胞膜系统,及增强细胞光合性能,从而提高其耐旱性。
2018年11期 v.35 1344-1352页 [查看摘要][在线阅读][下载 989K] [下载次数:488 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:0 ] - 王成;陈波浪;玉素甫江·玉素音;王前登;柴仲平;刘雪艳;
【目的】探寻不同施氮处理对香梨园土壤N_2O排放的影响。【方法】在香梨年生育期内,采用静态箱-气相色谱法对6 a树龄的‘库尔勒香梨’园进行定位监测。设置5个施氮水平:不施肥(N0P0K0)、不施氮肥(N0PK)、低氮量150kg·hm~(-2)(N1PK)、中氮量300 kg·hm~(-2)(N2PK)、和高氮量450 kg·hm~(-2)(N3PK)。【结果】不同施氮处理N_2O排放通量在一天不同时段表现为夜间(20:00—8:00)<上午(8:00—12:00)<中午(12:00—16:00)<下午(16:00—20:00);N_2O排放日累积量表现为:夜间<白天。不同施氮处理(N0P0K0、N0PK、N1PK、N2PK、N3PK)年生育期土壤N_2O累积量分别为341.616、346.548、437.000、459.748、531.960 g·hm~(-2)·a-1。施氮量在450 kg·hm~(-2)时,N_2O排放通量(下午)、日累积量、年生育期累积量均显著大于其他各处理。温度、灌水、施用氮肥均能影响土壤N_2O的排放,其中施用氮肥对土壤N_2O的排放影响最大,土壤N_2O的排放量随着施氮量的增加而增加。施氮量为150、300和450 kg·hm~(-2)时,N_2O排放系数分别为0.060%、0.038%和0.041%。【结论】随着氮肥(尿素)施用量的增加,N_2O排放系数先减小再增大,在尿素施用量为300kg·hm~(-2)(纯N)时,土壤N_2O排放系数最小(0.038%)。
2018年11期 v.35 1353-1362页 [查看摘要][在线阅读][下载 1021K] [下载次数:418 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:0 ] - 庞钰洁;陶宁颖;竺啸恒;陈心源;王莉;张望舒;贾惠娟;
【目的】明确根域限制栽培对桃树花芽分化的影响。【方法】2017年以普通桃‘圆梦’为试材,对花芽分化进程与叶片及芽碳氮含量和激素含量积累的相关性进行探讨。【结果】随着长果枝花芽着生位置向基部靠拢,花芽进入形态分化的时间越早,分化进程也越快;根域限制栽培一次枝长果枝基部6月16日前后花芽逐渐开始分化,比常规栽培早2周左右;伴随着生长进程叶片总氮量不断降低,C/N逐渐上升,根域限制栽培的花芽分化速度和成花率明显较常规栽培提高;花蕾原基分化初期转向末期时高水平的ZR含量和花萼分化期开始时ABA含量的增加有利于芽体形态分化,促进成花。【结论】相对较高的C/N能提早花芽分化时间,适当高水平的ZR和ABA有利于芽体形态分化的持续进行,因此根域限制栽培花芽分化速度快、成花率高。
2018年11期 v.35 1363-1373页 [查看摘要][在线阅读][下载 1092K] [下载次数:674 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:24 ] |[阅读次数:0 ] - 李秋利;高登涛;魏志峰;王志强;刘军伟;
【目的】探究桃叶片在不同SO_2浓度梯度胁迫下的叶绿素荧光参数及抗氧化酶活性的变化。【方法】以1 a(年)生桃盆栽嫁接苗为试材,测定分析不同SO_2浓度梯度胁迫下叶片叶绿素荧光动力学参数、抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量的变化。【结果】(1) Fm、Fv/Fm、Fv/F0均随SO_2浓度的升高而降低。随处理时间的延长,0.14 mg·m~(-3)处理和对照相比差异不显著,1.43 mg·m~(-3)和14.3 mg·m~(-3)处理显著下降。(2)随着SO_2浓度升高和处理时间的延长,qP、Y(Ⅱ)逐渐下降,而qN、Y(NPQ)逐渐上升,Y(NO)稳定在较低水平。(3)在O-J-I-P曲线中,中、高浓度SO_2处理使JIP点荧光强度出现不同程度的降低,并降低了FPo、FEo、ψo和光合机构性能指数(PIABS、PICSo和PICSm);不同SO_2浓度处理对F0、Fp、VJ、Mo的影响不显著。(4) 0.14 mg·m~(-3)SO_2浓度处理的叶片抗氧化酶活性和MDA含量与对照相比差异不显著,1.43 mg·m~(-3)和14.3 mg·m~(-3)SO_2浓度处理的叶片抗氧化酶活性和MDA含量高于对照,14.3 mg·m~(-3)处理的SOD、POD和CAT活性先升高后降低,MDA含量则逐渐升高。(5)用荧光诱导动力学曲线可以快速检测桃叶片在二氧化硫胁迫下的生理响应。【结论】0.14 mg·m~(-3)SO_2处理对叶片的光合机构无显著影响,1.43 mg·m~(-3)和14.3 mg·m~(-3)SO_2胁迫下,叶片PSⅡ反应中心关闭或不可逆失活,表现出光抑制,14.3 mg·m~(-3)SO_2胁迫影响更显著。
2018年11期 v.35 1374-1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 1161K] [下载次数:473 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:3 ] - 邓小芳;吕臣浩;黄立强;张海清;赵竹青;刘新伟;
【目的】明确猕猴桃耐硒能力,深入探索喷施时期和硒源对猕猴桃各部位硒含量、累积分配、有机转化及品质的影响,以期为富硒猕猴桃的生产提供理论依据。【方法】以‘金桃’猕猴桃为试验材料:试验一,选取Na_2SeO_3和Na_2SeO_4为硒源,分别设50、100、200、300 mg·L~(-1)4个硒水平,均于幼果期喷施;试验二,基于试验一研究结果,分别于幼果期、膨大期和糖分累积期喷施100 mg·L~(-1)两种硒源。【结果】当两种硒源喷施质量浓度>100 mg·L~(-1)时,猕猴桃树出现叶片变黄、焦枯等中毒症状。果肉硒含量随喷施时期后移而显著降低,但果皮中硒含量呈现出相反的变化趋势。Na_2SeO_4处理下,猕猴桃果实各部位硒含量是Na_2SeO_3处理的1.1~1.8倍。无论何时喷施何种硒源,果肉和果皮的硒有机化率分别可超过60%和75%。叶面施硒可通过可溶性固形物和维生素C含量的增加、可滴定酸含量的降低,提升猕猴桃的品质。【结论】硒酸盐富硒效果较好,喷施时期后移,猕猴桃果肉硒累积占比下降。
2018年11期 v.35 1385-1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 852K] [下载次数:502 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:37 ] |[阅读次数:1 ] - 程和禾;陈龙;李玉生;吴雅琴;吴永杰;艾治国;李友刚;赵艳华;
【目的】观察温室条件下甜樱桃花芽形态分化时间和各时期的特征,为栽培者进行适时管控、提高花芽分化质量提供理论依据。【方法】从温室甜樱桃硬核期开始,定期取‘美早’‘红灯’‘早大果’3个品种的花芽,利用石蜡切片法观察花芽形态分化状态。【结果】昌黎温室中‘美早’花芽在3月中旬开始形态分化,至6月中旬雌蕊原基分化完成,分化时间持续85 d左右。‘红灯’和‘早大果’形态分化于3月下旬开始,6月下旬完成,持续90 d左右。乐亭‘美早’花芽形态分化比昌黎早15 d开始,花芽分化持续时间100 d左右,分化速度慢于昌黎。‘美早’花芽分化开始于硬核期,‘红灯’和‘早大果’花芽分化开始于成熟期前后。【结论】花芽分化开始时间不能根据品种成熟期来判断,应通过观察分化状态来确定。每个品种花芽形态分化开始时间与其成熟期的关系相对稳定。
2018年11期 v.35 1393-1398页 [查看摘要][在线阅读][下载 1129K] [下载次数:541 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:0 ] - 宁万军;张强;黄闽敏;王国安;刘旭丽;
【目的】探究喷施元素肥对核桃的作用,为降低核桃露仁率、提高核桃品质提供科学依据。【方法】对新疆主栽核桃品种‘温185’和‘新新2’分别喷施N、P、K、Zn、Ca、Mg元素肥,测定单果的不同指标,研究元素肥对核桃品质的影响。【结果】喷施K、Ca、Mg元素肥,核桃单果质量可显著提高6.50%~14.36%;喷施K元素肥,仁质量可显著提高8.09%~8.71%;喷施K、Zn、Ca、Mg肥,均能显著提高核桃果壳的厚度,并显著降低果实露仁率,露仁率从23.00%~28.00%(对照)降低到0~7.00%。树冠上层内核桃果壳厚度明显大于下层内果壳厚度,树冠内膛核桃果壳最薄,露仁也最严重。【结论】核桃露仁情况严重,是品种特性、肥效、光照条件的共同作用,生产中除加强修剪管理外,还应在硬壳期喷施K、Ca、Mg元素肥,进而降低露仁率。
2018年11期 v.35 1399-1405页 [查看摘要][在线阅读][下载 923K] [下载次数:215 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:0 ]
- 孟宪儒;陈亦君;张文;马会勤;
‘学优红’葡萄是以‘罗萨卡’为母本、‘艾多米尼克’为父本杂交选育出的中熟欧亚种葡萄新品种。该品种丰产性中等,冬芽成花能力强,果穗大小中等,平均500 g,果穗紧实度中等。果粒大,平均粒质量8.9 g,果粒椭圆形,果皮蓝紫色,皮薄,易着色,平均每个果粒中有1~2粒正常发育的种子;果肉脆硬,味香甜、多汁、可溶性固形物含量(w)20.1%,品质上等,具有较好的树上挂果和延迟采收能力。在北京地区萌芽期为3月下旬,开花期为5月中下旬,花为雌能花,需配置授粉品种,果实成熟期为8月中旬。
2018年11期 v.35 1430-1432页 [查看摘要][在线阅读][下载 1573K] [下载次数:190 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 胡青;范志远;李思广;赵廷松;曾清贤;潘莉;刘娇;饶绍松;邹伟烈;杜春花;王斌;
云南省东北区域晚霜危害严重,严重缺乏避晚霜能力强的核桃品种。云南省林业科学院和鲁甸县林业局在鲁甸县通过实生选育,选育出了早实核桃新品种‘云林7号’。通过2010—2016年5 a(年)的观测结果表明,定植1 a生嫁接苗第3年开花结果,高枝嫁接第2年开花结果。坚果三径平均3.40 cm,壳厚1.03 mm,果质量14.66 g,仁质量8.51g,出仁率58.05%,含油率69.4%,蛋白质含量(w)18.9%,取仁易,仁黄白,肥仁,饱满,食味香无异味。2016年12月通过云南省林木良种审定委员会良种认定。该品种避霜性好,适合在云南省东北区域、贵州、四川、湖北、重庆等地区栽培。
2018年11期 v.35 1433-1436页 [查看摘要][在线阅读][下载 1390K] [下载次数:162 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ]