果树学报

2006, (05) 659-663

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超声波辅助农杆菌介导八棱海棠转rolC基因
Transformation of rolC gene to Maius robusta by SAAT

丛郁;王三红;王红霞;姚泉洪;章镇;

摘要(Abstract):

应用超声波辅助农杆菌介导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,以期提高转化效率并获得转基因植株。利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理时期和农杆菌悬浮液中乙酰丁香酮(As)浓度对rolC基因转化率的影响。结果表明,叶盘在D600nm为0.6且含有75 mg/L As的农杆菌悬浮液中侵染2 min后,用功率为100 W的超声波处理30 s,再浸泡2.5 min,然后放到再生培养基上共培养3 d,能获得最佳的gus基因瞬间表达率。最佳处理条件下转化683枚八棱海棠叶片,共得到138个抗性愈伤组织和15株抗性苗,转化率为2.2%。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有12个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。

关键词(KeyWords): 八棱海棠;超声波辅助农杆菌转化;rolC基因

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(30370987);; 江苏省应用基础研究资助项目(BJ200018)。

作者(Author): 丛郁;王三红;王红霞;姚泉洪;章镇;

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DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.2006.05.001

参考文献(References):

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