果树学报

2017, v.34(01) 19-25

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苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究
Pathogenic function of pectate lyase gene Vmpl4 of Valsa mali in apple

许春景;孙迎超;吴玉星;冯浩;高小宁;黄丽丽;

摘要(Abstract):

【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8与寄主互作过程中的表达水平及Vmpl4敲除后PL家族内其他基因的表达水平,通过Doublejoint PCR构建基因敲除载体,并通过PEG介导原生质体遗传转化获取转化子、PCR及Southern blot验证基因敲除突变体。利用苹果叶片和枝条离体接种方法检测突变体致病力;接种至PDA及果胶培养基,观察突变体的营养生长和对果胶的利用情况。【结果】Vmpl4在病菌侵染过程中上调表达高达10.20倍;通过验证得到1个基因敲除突变体,其在叶片和枝条上的致病力均显著降低,在果胶培养基上生长速率也明显降低,Vmpl4敲除后家族内4个基因在病菌侵染过程中表达水平显著上调。【结论】果胶裂解酶基因Vmpl4通过降解果胶参与致病过程,PL家族内其他基因与Vmpl4在病菌致病性方面共同发挥作用。

关键词(KeyWords): 苹果树腐烂病菌;果胶裂解酶;基因敲除;致病力

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31171796和31471732);; 国家公益性行业(农业)科研专项(201203034);; 高等学校博士学科点基金(20120204110002)

作者(Author): 许春景;孙迎超;吴玉星;冯浩;高小宁;黄丽丽;

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