果树学报

2012, v.29(03) 416-422

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黄龙病诱导下椪柑SSH文库的构建与分析
Construction and analysis of subtractive cDNA library from ponkan (Citrus reticulate) leaves following infection with Honglongbin pathogen

钟云;姜波;易干军;曾继吾;王辉;蒋侬辉;周碧容;

摘要(Abstract):

以实生苗和平椪柑(Citrus reticulate Blanco)为材料,采用抑制性差减杂交技术,分别以感染黄龙病与未感染黄龙病的椪柑叶片为检测方(tester)和驱动方(driver),成功构建了黄龙病诱导的差减cDNA文库。挑选了100个阳性克隆并成功测序得到71条EST,经NCBI基因库同源性比对,有41条非冗余高质量EST序列找到了同源序列,另有10条非冗余未搜索到同源序列。同源序列的基因涉及抗逆防御、运输、能量代谢、光合作用、蛋白代谢、信号转导、抗氧化等代谢途径和生理生化过程。值得注意的是文库中有由病原引起的韧皮部相关的凝集素蛋白的前体积累。挑选了2条进行Q-PCR定量分析,结果表明感病1周表达量增强不大,2周后tester的表达量明显高于driver,说明材料感病早期这些基因表达增强。

关键词(KeyWords): 椪柑;黄龙病;SSH;基因文库;差异表达基因

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30700550);; 公益性行业专项(201203075-07)

作者(Author): 钟云;姜波;易干军;曾继吾;王辉;蒋侬辉;周碧容;

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