果树学报

2016, v.33(12) 1477-1491

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华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析
Characteristic analysis of powdery mildew resistance of ubiquitin ligases VpUIRP2 and VpUIRP3 from Chinese wild Vitis pseudoreticulata

王辰;姚文孔;谢小青;童威霍;王磊;王杰;王跃进;

摘要(Abstract):

【目的】分析华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’的Ring型泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的转基因植株对葡萄白粉病的抗性,研究这2个基因的抗白粉病特性,为改良欧洲葡萄抗病性提供可用基因。【方法】利用同源克隆的方法获得中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的编码区序列(CDS);通过实时荧光定量PCR方法检测其在白粉菌诱导和水杨酸处理后的葡萄叶片中的表达;使用聚乙二醇(PEG)介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位;通过农杆菌介导法获得转基因‘无核白’和‘红地球’植株;经过苯胺蓝染色,利用血球计数板计数分析白粉菌在转基因植株叶片上的生长情况,鉴定转基因株系的抗病性。【结果】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3响应白粉菌和水杨酸处理,表达模式明显区别于感病对照‘赤霞珠’。中国野生华东葡萄‘白河-35-1’VpUIRP2蛋白定位在细胞质,VpUIRP3蛋白定位无特异性。通过农杆菌介导的遗传转化获得4个VpUIRP2的转基因‘红地球’株系和1个‘无核白’株系,转基因株系对白粉病表现出抗性。【结论】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2能增强葡萄对白粉病的抗性,可以作为抗病基因用于改良欧洲葡萄的抗病性。

关键词(KeyWords): 中国野生华东葡萄;泛素连接酶;白粉病;遗传转化;表达分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(No.31171924)

作者(Author): 王辰;姚文孔;谢小青;童威霍;王磊;王杰;王跃进;

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DOI:

参考文献(References):

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