果树学报

2009, v.26(01) 60-65+130

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草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立
Establishment of transient expression system of foreign gene with strawberry fruit

刘敏;滕文静;董清华;晁慧娟;李凤岚;邱德有;

摘要(Abstract):

将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane13α-hydroxylase,13OH)基因全长cDNA正向插入到pCAMBI-A1304,构建其植物表达载体pCT13OH;将水稻小RNA169d(microRNA169d,miRNA169d)基因前体(precursor)全长DNA正向插入到pCAMBIA1305.1,构建其植物表达载体pCO169d。用电击法把它们导入根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株。用1mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragaria×ananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达。对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12h和0.5mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因13OH和调节基因miRNA169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功。

关键词(KeyWords): 草莓;果实;瞬时表达;根癌农杆菌;基因功能

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家高技术研究发展计划—“863”计划(2007AA10Z182);; 国家自然科学基金(30671698);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(200701);; 北京市教委植物遗传育种改良与种质资源创新平台(5075201029)

作者(Author): 刘敏;滕文静;董清华;晁慧娟;李凤岚;邱德有;

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