柑橘组织RNA提取方法研究A Study on Methods for RNA Extraction From Citrus Tissues
徐昌杰,陈昆松,张波,王钱洁,叶薇佳
摘要(Abstract):
从操作耗时、所得RNA产量和质量等方面比较了5种RNA提取方法提取甜橙叶片、幼果、成熟果实果皮和汁囊组织RNA的效果。结果表明,改良Bugos法能从上述4种组织中获得较高产量和质量的RNA。用该方法提取的温州蜜柑成熟果实果皮RNA经RT-PCR扩增成功得到了蔗糖磷酸合成酶cDNA片段。该方法还可适用于猕猴桃、梨、甜瓜、龙眼、苹果和桃果肉RNA的提取。
关键词(KeyWords): 柑橘果实;RNA;提取;电泳;RT-PCR
基金项目(Foundation): 国家重点基础研究发展规划项目(973项目)(G2000046806);; 国家自然科学基金(批准号:30100125,30270917;30370989);; 浙江省自然科学基金(批准号:ZD0004;301291)
作者(Author): 徐昌杰,陈昆松,张波,王钱洁,叶薇佳
参考文献(References):
- [1]SambrookJ,FritschEF,ManiatisT著.分子克隆(第二版)[M].金冬雁,黎孟枫译.北京:科学出版社,1995.
- [2]Lopez-GomezR,Gomez-LimMA.AmethodforextractingintactRNAfromfruitsrichinpolysaccharidesusingripemangomesocarp[J].HortScience,1992,27:440~442.
- [3]陈昆松,徐昌杰,张上隆,等.富含多糖猕猴桃果实组织中总RNA提取方法的改进[J].植物生理学通讯,1998,34:371~373.
- [4]AsifMH,DhawanP,MathP.AsimpleprocedurefortheisolationofhighqualityRNAfromripeningbananafruit[J].PlantMolBiolRep,2000,18:109~115.
- [5]LiuJJ,GohCJ,LohCS,etal.AmethodforisolationoftotalRNAfromfruittissuesofbanana[J].PlantMolBiolRep,1998,16:1~6.
- [6]BugosRC,ChiangVL,ZhangX,etal.RNAisolationfromplanttissuesrecalcitranttoextractioninguanidine[J].Biotechniques,1995,19:734~737.
- [7]ChangS,PuryearJ,CairneyJ.AsimpleandefficientmethodforisolatingRNAfrompinetrees[J].PlantMolBiolRep,1993,11:113~116.
- [8]李宏,王新力.植物组织RNA提取的难点和对策[J].生物技术通报,1999,15(1):36~39.