果树学报

2015, v.32(04) 546-554

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山葡萄‘通化-3’抗寒相关基因SSH文库的构建及分析
Construction and analyses of SSH libraries of cold resistance related genes in Vitis amrensis accession‘Tonghua-3'

米宝琴;毛娟;申鹏;陈佰鸿;郝燕;杨瑞;

摘要(Abstract):

【目的】克隆山葡萄抗寒相关基因和分析葡萄的抗寒机理。【方法】利用抑制性消减杂交技术(SSH),选用抗寒性强的山葡萄株系‘通化-3’和抗寒性弱的欧洲葡萄品种‘红地球’分别作Driver和Tester,建立了ASSH(山葡萄)与SSSH(‘红地球’)2个c DNA表达文库。【结果】差异表达克隆测序后经DNAMAN比对,从657个克隆中筛选出了70个Unigenes;通过BLAST比对分析,发现在ASSH文库中含有与山葡萄相关的r RNA基因内含子编码的归巢核酸内切酶、衰老相关蛋白质、细胞色素P450、抗冻蛋白、防御素样蛋白、热休克蛋白等相关的EST序列;SSSH文库中含有与‘红地球’相关的衰老蛋白。此外还发现了14个未知蛋白的ESTs序列。【结论】筛选出了与山葡萄抗寒性相关的AFPs、Haps、防御素样蛋白、细胞色素P450加单氧酶等多个相关的ESTs,以及14个未知蛋白序列,也可能参与山葡萄的抗寒代谢。

关键词(KeyWords): 山葡萄;‘红地球’;SSH;抗寒蛋白;差异表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然基金(31460500);; 甘肃省科技支撑计划(090NKCA058);; 甘肃省农牧厅农业科技创新项目(GNCX-2013-38)

作者(Author): 米宝琴;毛娟;申鹏;陈佰鸿;郝燕;杨瑞;

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