果树学报

2015, v.32(01) 156-162

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菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立
Detection of Pineapple mealybug wilt associated virus-3 by Real-Time Fluorescent Quantitative RT-PCR

胡加谊;李向宏;罗志文;范鸿雁;张治礼;刘志昕;何凡;

摘要(Abstract):

【目的】建立菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据PMWa V-3外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物和探针,通过优化PMWa V-3实时荧光定量PCR检测体系,构建以重组质粒为标准品的标准曲线,建立起PMWa V-3实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能特异性地检测PMWa V-3,且灵敏度是普通RTPCR的10倍;该方法重复性良好,组间和组内变异系数均小于1.73。【结论】建立的实时荧光定量PCR方法是一种快速、简便、可信度高的PMWa V-3定量检测方法。

关键词(KeyWords): 菠萝凋萎相关病毒-3;实时荧光定量PCR;TaqMan探针;检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 公益性行业(农业)科研专项经费项目(201203021);; 海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013020-3);; 海南省科学事业费项目(琼财预[2013]131号);; 海南省重点科技计划应用研究及产业化项目(ZDXM20130031);; 海南省自然科学基金项目(琼科[2013]32号)

作者(Author): 胡加谊;李向宏;罗志文;范鸿雁;张治礼;刘志昕;何凡;

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参考文献(References):

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