果树学报

1996, (01)

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西瓜花叶病毒2号外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
Cloning and Expression of Coat Protein Gene of Watermelon Mosaic Virus 2 in Escherichia coli

万莉,刘俊君,彭学贤,黄学森

摘要(Abstract):

以郑州地区西瓜花叶病病叶分离物──西瓜花叶病毒2号(2-WMV-)为毒源,从繁殖寄主西葫芦病叶中分离、鉴定了病毒。以病毒基因组RNA为模板,逆转录合成cDNA,通过多聚酶链式反应(PCR),从cDNA中扩增和克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因,其中包括3’端非编码区,完成了全部核苷酸序列分析。CP基因全长1099个苷耷酸,其中编码区长903个核苷酸,编码301个氨基酸,3’端非编码区长196个核苷酸。Z-WMV-2CP基因的编码区比A-WMV-2,U-WMV-2两株系的CP基因编码区分别长出60个核耷酸,多编码20个氨基酸。与两个株系相比,编码区的核昔酸序列同源性分别为88.5%和87.0%,氨基酸序列同源性分别为90.0%和88.7%,3,端非编码区的同源性分别为68.3%和71.8%。若不考虑Z-WMV-2多出的60个核苷酸及20个氨基酸,则上述同源性依次为95.4%、93.7%、96.4%、95.0%、88.8%和93.4%。构建了含WMV-2CP基因的大肠杆菌表达载体,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表达出了与天然病毒外壳蛋白分子量相同的蛋白。

关键词(KeyWords): 西瓜花叶病毒2号;外壳蛋白基因;基因表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国际科学和文化中心世界实验室(WL,ICSC,日内瓦、洛桑)的部分资助

作者(Author): 万莉,刘俊君,彭学贤,黄学森

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