果树学报

2015, v.32(06) 1107-1113

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西瓜抗根结线虫相关基因的克隆与表达分析
Molecular cloning and expression analysis of root-knot nematode resistance related gene in watermelon

薛莹莹;邓云;刘君璞;徐小军;朱迎春;安国林;李卫华;孙德玺;

摘要(Abstract):

【目的】筛选西瓜(Citrullus lanatus)抗根结线虫相关基因,克隆其全长CDS序列,检测根结线虫接种后其在抗病材料和感病材料中的表达特征,分析其与西瓜根结线虫抗性的关系。【方法】以抗根结线虫的野生西瓜‘09005’和易感根结线虫的栽培西瓜‘ZDPI0006’为试材,用已知的植物抗线虫基因在葫芦科基因组数据库中比对,从结果中筛选到西瓜的相关基因Cla006580,与甜菜抗孢囊线虫基因Hs1~(pro-1)同源性达到65%,命名为Cla Hs1~(pro-1)。克隆Cla Hs1~(pro-1)基因的CDS区序列并进行生物信息预测分析,在根结线虫接种处理和CK处理72 h内利用q RT-PCR技术检测不同抗性的西瓜根系中Cla Hs1~(pro-1)的表达特征。【结果】从野生抗病西瓜‘09005’和栽培易感西瓜‘ZDPI0006’中均克隆得到Cla Hs1~(pro-1)基因,CDS区序列全长1 434 bp,编码478个氨基酸,含有Hs1pro-1_N和Hs1pro-1_C两个蛋白保守结构域,抗、感材料之间存在4个SNP位点。RT-PCR分析显示‘09005’在接种根结线虫后Cla Hs1~(pro-1)表达趋势呈先抑后扬,而在CK中呈先扬后抑,二者相反;‘ZDPI0006’在接种根结线虫后Cla Hs1~(pro-1)表达趋势呈先上扬后抑制再上扬,与CK中表达趋势一致。【结论】西瓜Cla Hs1~(pro-1)基因在抗病材料中表达特征与根结线虫接种密切相关,而在感病材料中与根结线虫接种无明显相关性,是西瓜抗根结线虫可能的候选基因。

关键词(KeyWords): 野生西瓜;根结线虫;基因克隆;表达分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 中国农业科学院基本科研业务费项目(0192015020);中国农业科学院科技创新工程专项经费项目(CAAS-ASTIP-2015-ZFRI–06);; 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-26-14);; 河南省基础与前沿技术研究项目(142300410256)

作者(Author): 薛莹莹;邓云;刘君璞;徐小军;朱迎春;安国林;李卫华;孙德玺;

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DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20150199

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