果树学报

2013, v.30(05) 737-743

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

华东葡萄转录因子VpSBP3基因原核表达、纯化及多克隆抗血清制备
Prokaryotic expression,purification and polyclonal antiserum preparation of the transcription factor VpSBP3 gene from Vitis pseudoreticulata

王浩;侯鸿敏;殷向静;宋军阳;王西平;

摘要(Abstract):

【目的】制备华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)转录因子VpSBP3基因抗血清,为研究VpSBP3基因功能奠定基础。【方法】构建华东葡萄转录因子VpSBP3基因重组原核表达载体pGEX-VpSBP3,转化大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3),以IPTG为诱导剂诱导目的融合蛋白的表达。切胶电透析回收诱导表达的VpSBP3融合蛋白免疫新西兰兔,制备VpSBP3抗血清。【结果】重组原核表达载体pGEX-VpSBP3在DE3中高效表达出了分子质量为68 kD的GSTVpSBP3融合蛋白。回收的目的融合蛋白免疫新西兰兔后得到了抗血清,经Western-Blot检测,抗血清的免疫-抗原反应良好。【结论】在27℃、0.7 mmol·L-1IPTG过夜培养的诱导条件下,融合蛋白GST-VpSBP3过量表达。免疫大白兔获得的血清特异性强,效价高,可用于VpSBP3基因功能分析。

关键词(KeyWords): 华东葡萄;VpSBP3;转录因子;原核表达;多克隆抗血清

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31071782);; 基本科研业务费科技创新专项(QN2011056)

作者(Author): 王浩;侯鸿敏;殷向静;宋军阳;王西平;

Email:

DOI:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享