果树学报

2010, v.27(03) 397-403

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双T-DNA共转化获得转基因番木瓜
Generation of transgenic Carica papaya using two-T-DNA co-transformation

何玮毅;陈晓静;叶一江;申艳红;卢秉国;

摘要(Abstract):

番木瓜采后期间的迅速软化现象,导致果实的货架期十分短暂。利用RNAi-β-Gal双T-DNA植物表达载体p2301/TTRG,通过农杆菌介导,探索了液体振荡转化法和浸泡转化法对番木瓜胚性愈伤组织共转化效率的影响。经抗生素敏感性测定,将卡那霉素筛选质量浓度确定为150mg·L-1。在该质量浓度下,2种方法均获得了转基因再生植株,但转化效率仍较低。正交试验结果表明,浸泡转化法中各处理因素的作用大小为:AS质量浓度>共培养时间=菌液光密度值=侵染时间,最佳共转化组合为:100μmol·L-1AS+菌液光密度值0.2+侵染20min+共培养3d。经PCR和Southern杂交检测,所获得的5株再生植株中有2株为共转化的结果,诱导了其中1株生根并移栽。为进一步选育无选择标记基因的抗软化转基因番木瓜奠定了基础。

关键词(KeyWords): 番木瓜;果实软化;双T-DNA;共转化植株

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 福建省科技厅重点项目(编号:2008N0008)

作者(Author): 何玮毅;陈晓静;叶一江;申艳红;卢秉国;

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DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.2010.03.012

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