果树学报

2015, v.32(02) 335-338

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一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法
A simple and efficient method for isolating small RNAs from banana(Musa nana L.)

王静毅;冯仁军;柴娟;陈友;张银东;马子龙;武耀廷;

摘要(Abstract):

【目的】提供一种简单、经济、高效的香蕉小分子RNA提取方法,以满足RT-PCR、Northern杂交等分子生物学研究的需要。【方法】以巴西蕉(Musa acuminata L.AAA group,‘Brazilian’)的叶片、雄花、果实和根系为材料,利用改良的CTAB法,结合使用PEG8000分级沉淀DNA和大分子RNA,从而获得小分子RNA。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示小RNA带型清晰,无DNA和大分子RNA干扰,说明小RNA质量较好。获得的小RNA经紫外光谱分析其A260/A280的比值在1.872~2.020,产量可达35μg·g-1。以提取的各组织小分子RNA为模板,利用茎环RT-PCR方法在香蕉不同组织小RNA中均检测到mi RNA156a,其扩增片断大小约为70 bp,且测序结果与预测的香蕉mi R156a序列一致。【结论】本实验提供了一种简便高效的香蕉小分子RNA提取方法,可满足RT-PCR、Northern blotting及小RNA文库构建等后续分子生物学研究的需要,为研究人员在实际工作中提供了更多的选择。

关键词(KeyWords): 香蕉;小分子RNA;提取

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(ITBB130201,1630052014006);; 海南省自然科学基金(312050,312051);; 国家自然科学基金(31201603);; 海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013023-1)

作者(Author): 王静毅;冯仁军;柴娟;陈友;张银东;马子龙;武耀廷;

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DOI:

参考文献(References):

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