果树学报

2011, v.28(04) 717-720

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葡萄斑点病毒的RT-PCR检测
RT-PCR detection of Grapevine fleck virus

卓娜;王国平;邓丛良;洪霓;

摘要(Abstract):

由葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFkV)引起的葡萄斑点病是世界上普遍发生的葡萄病毒病害。采用RT-PCR从表现明显斑点症状的葡萄样品维多利亚、无核白鸡心和胜宝叶片中检测到预期大小为179 bp的片段。对这些扩增片段进行克隆、序列测定及比对分析,结果表明,来源于这3个样品的GFkV序列间相似性为97.2%~98.9%,与NCBI已登录GFkV序列AJ309022的相似性为96.6%~97.8%。在此基础上,采用纳米磁珠法从以上3个葡萄品种的休眠枝条韧皮部与休眠芽中提取病毒RNA,根据上述已测序列设计合成了TaqMan探针与引物,初步建立了GFkV的MNP Real time-RT-PCR检测体系。结果表明,无核白鸡心中GFkV含量最高,且该病毒在休眠芽中的含量比韧皮部约高出10倍,通过MNP Real time-RT-PCR最低可从100μg葡萄组织中检测到GFkV。

关键词(KeyWords): 葡萄斑点病毒;纳米磁珠;Realtime-RT-PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家“十一五”支撑计划项目(2006BAD08A16);; 国家公益性课题(20111035)

作者(Author): 卓娜;王国平;邓丛良;洪霓;

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参考文献(References):

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