果树学报

2011, v.28(02) 209-214

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化
Optimization of Start Codon Targeted Polymorphism PCR(SCoT-PCR) system in Vitis vinifera

张君玉;郭大龙;龚莹;刘崇怀;李猛;张国海;

摘要(Abstract):

SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16(45)正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2+浓度。综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为:Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTPs 0.3 mmol.L-1、Taq酶1.0 U、引物0.3μmol.L-1、DNA模板30 ng,总体积20μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,54℃退火1 min,72℃复性2 min,34个循环;最后72℃延伸8 min。该反应体系在20个葡萄品种的验证中表现出良好的稳定性和可重复性,该反应体系的建立为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建、分子标记辅助选择育种等研究提供了新的技术手段。

关键词(KeyWords): 葡萄;SCoT;正交设计;单因素试验;体系优化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(NSFC:30800742);; 河南省教育厅自然科学研究计划(2009B210003);; 国家葡萄产业技术体系(nycytx-30-zy-01)

作者(Author): 张君玉;郭大龙;龚莹;刘崇怀;李猛;张国海;

Email:

DOI:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享