果树学报

2013, v.30(01) 48-54

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‘琯溪蜜柚’荧光定量PCR内参基因的筛选
Validation of internal reference genes for qRT-PCR normalization in ‘Guanxi Sweet Pummelo’(Citrus grandis)

王梨嬛;潘永娟;杨莉;蔡盛华;黄新忠;

摘要(Abstract):

【目的】为了克隆‘琯溪蜜柚’的管家基因,并筛选合适的管家基因作为内参,【方法】以‘琯溪蜜柚’盛花期后5个不同时期的果实汁胞,以及根﹑茎﹑叶为材料,采用实时荧光定量PCR技术,分析actin1﹑β-tubulin﹑18S rRNA﹑EF1-α和Ubiquitin 5个管家基因在不同材料中的表达情况,并结合geNorm、NormFinder﹑comparative Delta-CT和BestKeeper 4种评估方法进行稳定性分析。【结果】结果表明,actin1和β-tubulin是‘琯溪蜜柚’果实发育进程中较为稳定的内参基因,而EF1-α和β-tubulin则是研究不同组织特定靶基因表达中稳定的内参基因。【结论】筛选出了‘琯溪蜜柚’最佳的内参基因β-tubulin,为今后目的基因的表达分析奠定了基础。

关键词(KeyWords): ‘琯溪蜜柚’;荧光定量PCR;内参基因

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金青年科学基金(30900978);; 浙江师范大学博士科研启动基金(ZC304006122)

作者(Author): 王梨嬛;潘永娟;杨莉;蔡盛华;黄新忠;

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DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.2013.01.014

参考文献(References):

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