果树学报

2015, v.32(01) 150-155

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苹果锈果类病毒实时荧光PCR检测方法的建立
Establishment of detection method for Apple scar skin viroid(ASSVd) by Real-Time PCR

吴然;李君英;邵建柱;孙建设;张鹤;

摘要(Abstract):

【目的】建立苹果锈果类病毒(ASSVd)检测灵敏的方法。【方法】根据Gen Bank中ASSVd的RNA序列设计特异性引物ASSVd-F和ASSVd-R,利用实时荧光PCR方法对其进行检测,并对体系的特异性、灵敏性及适用性进行验证。【结果】实时荧光PCR体系能检测至1×10-6的模板浓度,而常规RT-PCR只能检测至1×10-4,由此可知,实时荧光PCR体系灵敏度高于常规RT-PCR 100倍;引物特异性强,能特异检测ASSVd,对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)均不能检出;适用性广,可检测出植物不同部位的ASSVd。【结论】所建立的方法能够灵敏检测ASSVd,特异性强,适用性广。

关键词(KeyWords): 苹果锈果类病毒(ASSVd);检测;实时荧光PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家苹果产业技术体系项目(CARS-28)

作者(Author): 吴然;李君英;邵建柱;孙建设;张鹤;

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参考文献(References):

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