果树学报

2004, (03) 204-207

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猕猴桃基因组DNA文库的构建
Construction and Application of A Genomic DNA Library of Actinidia deliciosa

许文平,徐昌杰,陈昆松,张上隆

摘要(Abstract):

采用改良CTAB法提取美味猕猴桃(Actinidiadeliciosacv.Bruno)基因组DNA,经CsCl密度梯度离心纯化后用Sau3AI部分酶切,通过透析袋电泳的方法分级回收,剔除14kb以下的片段,回收长为14~23kb的酶切片段。部分酶切片段经dATP和dGTP部分补平后与LambdaFIXII载体连接,连接产物用GigapackⅢPackagingExtract进行包装,最后得到含有1.05×106pfu的基因组文库,扩增后文库滴度为2.5×109pfu/mL。利用6对根据植物基因保守区或猕猴桃基因序列设计的专一引物对基因组文库和基因组DNA进行PCR扩增,均得到与预计长度相符的目的基因片段。RR

关键词(KeyWords): 猕猴桃;基因组DNA文库;PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点基础研究发展规划项目(973项目)(G2000046806);; 国家自然科学基金(30270917);; 浙江省自然科学基金重点资助项目(ZD0004)。

作者(Author): 许文平,徐昌杰,陈昆松,张上隆

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