果树学报

2010, v.27(05) 752-756

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

苹果茎沟病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备
Prokaryotic expression of cp genes from apple stem grooving virus and production of antisera against recombinant coat proteins

宋艳苏;郑银英;李丽娜;王国平;洪霓;

摘要(Abstract):

构建了来源于梨的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)分离物P-4-1-69和P-L2的原核表达载体pET-P-4-1-69和pET-P-L2,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1 mmol.L-1 IPTG下诱导表达。SDS-PAGE和用商业化ASGV抗体对诱导表达产物进行Western Blot分析结果表明,2个分离物的外壳蛋白基因(cp基因)在大肠杆菌中成功地进行了高效表达,重组外壳蛋白的大小约为31 ku。分别用含分离物P-4-1-69和P-L2的重组外壳蛋白的胶条免疫大耳白兔,制备了抗ASGV重组外壳蛋白的抗血清。采用间接ELISA法用所制备的抗血清对回收的重组外壳蛋白进行检测,当抗分离物P-4-1-69和P-L2的重组外壳蛋白的抗血清分别稀释512 000倍和64 000倍时,检测结果仍为阳性。Western Blot分析和组织免疫印迹检测(Tissue blotting immunoassay,TBIA)结果表明,纯化的抗体具有较强的特异性,可有效检测梨样品中的ASGV。

关键词(KeyWords): 苹果茎沟病毒;cp基因;原核表达;抗血清

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家梨产业技术体系(nycytx-29-08)

作者(Author): 宋艳苏;郑银英;李丽娜;王国平;洪霓;

Email:

DOI:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享