果树学报

2019, v.36(07) 947-953

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西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用
Establishment and application of the Telosma mosaic virus and Cucumber mosaic virus Duplex RT-PCR System in passionfruit

焦楠;朱宁;程春振;林玉玲;李汉生;陈发兴;赖钟雄;

摘要(Abstract):

【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L~(-1)和8.0 mmol·L~(-1);最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。

关键词(KeyWords): 西番莲;夜来香花叶病毒;黄瓜花叶病毒;病毒检测;双重RT-PCR技术

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 福建省高原学科建设经费(102/71201801101);; 福建农林大学水果产业乡村振兴服务团队项目(102/69914001003)

作者(Author): 焦楠;朱宁;程春振;林玉玲;李汉生;陈发兴;赖钟雄;

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DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20190012

参考文献(References):

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