果树学报

2007, (02) 140-145

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核桃SSR反应体系的优化
Optimization of SSR analysis system in walnut

刘晓丽;何天明;张美勇;张立杰;慈志娟;张春雨;陈学森;

摘要(Abstract):

以清香、香铃、爱米格为试材,利用CTAB法提取基因组DNA,将PCR体系的主要成分设定5个梯度,根据每个成分的变化引起的PCR-SSR的效果差异,探讨了核桃SSR技术中PCR体系的主要成分对扩增结果的影响,并对引物WGA321的适宜退火温度进行优化。最终确定了引物WGA321的最适退火温度为48~52℃,PCR反应体系的最佳条件为:15μL体系中,Mg2+1.0mmol/L,dNTPs浓度0.40mmol/L,TaqE用量为0.5U,DNA模板1.0ng/μL,引物浓度为0.4μmol/L。利用此反应体系对部分核桃品种进行PCR扩增并电泳检测,扩增结果清晰且有较高的多态性,表明该体系适合核桃的亲缘关系分析。

关键词(KeyWords): 核桃;SSR;优化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30471196)。

作者(Author): 刘晓丽;何天明;张美勇;张立杰;慈志娟;张春雨;陈学森;

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