果树学报

2011, v.28(05) 909-914

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西瓜交替氧化酶AOX2基因的克隆与分析
Cloning and analysis of the alternative oxidase-2(AOX2) gene in watermelon

李严曼;朱磊;杨景华;张明方;

摘要(Abstract):

为了研究西瓜交替氧化酶基因家族在西瓜植株中可能发挥的功能,以西瓜(Citrullus lanatus)耐冷种质IVSM9为材料,根据植物不同物种交替氧化酶基因核苷酸保守区序列设计兼并引物,得到西瓜交替氧化酶(alterna-tive oxidase)AOX基因的中间片段。在已知序列的基础上,分别设计5’和3’末端扩增的特异引物,采用cDNA末端快速扩增(RACE)的方法得到西瓜交替氧化酶基因的5’端和3’端序列,用DNAMAN5.22软件对3个序列进行拼接和分析,获得全长序列。得到的基因片段同其他物种AOX基因家族中的alternative oxidase-2(AOX2)基因具有高度的同源性,因此命名ClAOX2。根据拼接得到的cDNA全长序列设计5’和3’两端引物,得到ClAOX2基因DNA和cDNA的全长序列。该基因cDNA全长为1 263 bp,开放阅读框架为1 050 bp,编码349个氨基酸。DNA全长1 983bp,存在3个内含子。目前该基因已在GenBank注册,登录号为ADD84880。荧光定量分析表明,ClAOX2基因在西瓜根、茎、叶、花、果等各个组织中均有表达,且在果实中的表达量最高。因此推测该基因可能在西瓜果实的发育中发挥作用。

关键词(KeyWords): 西瓜;交替氧化酶;克隆;基因表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(NSFC30771478);; 国家现代农业产业技术体系(CARS-26-17);; 国家高技术研究发展计划(863计划)(2010AA10A107-2)

作者(Author): 李严曼;朱磊;杨景华;张明方;

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